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對微流成像法檢測蛋白制劑分析??!

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2023-09-18 08:54【

    微流成像技術(shù)雖然能夠利用微通道流通池和 高速攝影機(jī)對樣品中不溶性微粒進(jìn)行快速的檢測, 但其檢測結(jié)果也受限于樣品的光學(xué)特性。當(dāng)?shù)鞍? 質(zhì)在與水性質(zhì)接近的緩沖液中,水溶液與蛋白質(zhì) 形成的不溶性微粒有明顯的折光率區(qū)別,檢測結(jié) 果相對準(zhǔn)確,但當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)所處緩沖體系折光率發(fā)生 變化時,會使不溶性微粒檢測結(jié)果和圖像參數(shù)發(fā)生 偏移,無法真實(shí)反映制劑中不溶性微粒的濃度和粒 徑情況。天平,沈陽杰龍儀器有限公司;阿貝折射 儀,上海力辰邦西儀器科技有限公司;微流成 像儀(FlowCAM),美國Yokogawa Fluid Imaging Technologies Inc;水浴鍋(DF-101S 型),鞏義市 予華儀器有限公司。


    可以觀察到BSA溶液(22.5%海藻糖) 中顆粒濃度和稀釋倍數(shù)之間線性關(guān)系較差。當(dāng)溶劑 濃度大于0.18%時,溶液顆粒呈現(xiàn)不規(guī)則下降;直 到溶劑濃度下降為0.18%以后再繼續(xù)稀釋,溶液中 顆粒濃度才會隨稀釋倍數(shù)的增加等梯度下降。若在 顆粒濃度不受折光率影響的理想情況下,顆粒濃度 會隨著稀釋倍數(shù)增加呈現(xiàn)梯度下降,即為不同海 藻糖濃度下的理論顆粒含量;在對蛋白質(zhì)溶液中 不溶性微粒檢測時,可首先考察溶液的折光率,若 制劑溶液折光率接近蛋白質(zhì)不溶性微粒的折光率 時,可以將高折光率的溶液稀釋到與水溶液接近的 折光率,去除折光率對蛋白質(zhì)顆粒的屏蔽作用,再 通過稀釋倍數(shù)反推出原液中顆粒的真實(shí)濃度。




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